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中国生物工程杂志 2015
一种新型高糖基化免疫融合蛋白nesp-fc的研制Keywords: 贫血,新红细胞生成刺激蛋白(nesp),融合蛋白,cho细胞 Abstract: 新红细胞生成刺激蛋白(nesp),是重组人红细胞生长素(rhepo)的一种高糖基化类似物,它含有5个n端糖链和比rhepo高2倍的唾液酸残基,具有较好的代谢稳定性和3倍于rhepo的半衰期。在新红细胞生成刺激蛋白(nesp)的基础上,通过nesp的cdna与人igg2的铰链区与ch2和ch3的cdna连接,形成了融合蛋白nesp-fc,来达到提高nesp半衰期的目的。表达载体的构建、融合蛋白的表达纯化和初步的功能性试验等一系列研究证实,所表达的融合蛋白主要以二聚体形式存在;nesp-fc能明显促进ut-7细胞的生长和小鼠体内网织红细胞的增殖;在大鼠体内的研究发现其半衰期高达56h;小试规模重组蛋白的表达量在1.4g/l左右。这些研究为该融合蛋白最终实现临床应用和产业化打下了良好的基础。
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