hnrnpk与nef相互作用并有利于细胞表面cd4的表达

目的:前期不同的研究分别证明hiv蛋白nef下调宿主细胞表面受体cd4的表达,以及nef与宿主细胞蛋白heterogeneousnuclearribonucleoproteink(hnrnpk)存在相互作用。因此提出了两个值得研究探讨的重要问题:(1)hnrnpk是否参与调节细胞表面cd4的表达?(2)nef是否通过hnrnpk调节细胞表面cd4的表达?方法:利用半体外gst-pulldown技术验证nef与hnrnpk存在相互作用。通过瞬时转染的方式将hiv-1nef表达在hela-cd4细胞里,同时利用sirna干扰技术敲低hnrnpk,最后运用流式细胞技术检测细胞表面cd4的表达水平。结果:(1)gst-pulldown结果验证了nef与hnrnpk存在相互作用;(2)nef的表达使细胞表面cd4水平下降约75%;(3)不管是否有nef,hnrnpk的敲低都使细胞表面cd4表达水平明显下降(50%);同样的,nef下调cd4的作用也不受hnrnpk敲低的影响。结论:(1)hnrnpk与nef相互作用;(2)hnrnpk有利于细胞表面cd4的表达,其与nef的下调作用的关系尚不明确,nef对cd4的下调作用可能涉及有其他因素参与的复杂调控。