重组水蛭素ⅲ分子改建及其构效关系的初步研究

采用一种新的pcr定点诱变技术成功地对野生型水蛭素ⅲ进行了定点诱变,这种方法快速、简便,有效。通过突变,将野生型水蛭素ⅲ分子的活性功能非必需区的指状结构顶端第33～36位的氨基酸残基替换为rgds序列,并进行了高效分泌表达,表达产物分泌到细胞外发酵液中。改构的水蛭素突变体与野生型水蛭素ⅲ相比,两者的抗凝血酶活性基本一致,但体外抗血小板凝集试验结果表明,前者除原有的抗凝活性外还具有显著的抗adp诱导的血小板凝集活性,该研究为水蛭素ⅲ分子的结构功能关系研究以及新型抗凝药物的研制打下了基础。