累积番茄红素的大肠杆菌工程菌及其培养条件的研究

噬夏孢欧文氏菌番茄红素合成相关基因crte,crtb,crti同时克隆进表达载体pet-15b构建pet-15bcrtieb，将该重组质粒转化e.colibl21(de3)构建工程菌,iptg诱导工程菌累积红色色素，经hplc和吸收光谱分析，工程菌中合成的色素为番茄红素。研究了碳源、金属离子、培养温度、诱导剂浓度、诱导时间等参数对工程菌生长及色素累积的影响，确定了合适的培养条件：培养基为改良lb培养基（蛋白胨10g/l、酵母提取物5g/l、麦芽糖5g/l、mgcl20.1g/l，nacl10g/l）；起始培养温度为37℃；培养至od600为0.6左右时加入iptg，终浓度为0.5mmol/l，诱导温度降至30℃；诱导时间为14h。发酵完成后工程菌的生物量（干重）为3.45g/l，番茄红素的最高含量可达5.8mg/gdw。