农杆菌介导甘蔗愈伤组织遗传转化体系的优化

以甘蔗胚性愈伤组织为材料,对愈伤组织增殖、分化、幼苗生根的最适抗生素(km)浓度进行筛选,并对影响农杆菌介导的甘蔗遗传转化因素:预培养时间、侵染时间和共培养时间等进行了研究。最后确立了甘蔗愈伤组织增殖、分化及幼苗生根三个阶段的最适抗生素(km)浓度分别为300mg/l,40mg/l,20mg/l。确定了农杆菌浸染的预培养时间、侵染时间和共培养时间分别为4d,30min,4d。pcr检测表明,61.6%的抗性植株可扩增出预期的片段,表明外源基因已经整合到甘蔗基因组中。为进一步的甘蔗基因功能验证及转基因研究提供良好的技术支撑。