性逆转石斑鱼脑垂体差异表达基因克隆的筛选

以17α甲基睾丸酮投喂赤点石斑鱼(epinephelusakaara),成功地获得了性逆转的有功能的雄鱼。用smartcdna合成和长片段pcr技术构建了性逆转前后脑垂体cdna文库;用抑制消减杂交技术建立了性反转前后抑制性差减文库。对获得的560个雄鱼脑垂体pcr阳性克隆和350个雌鱼脑垂体pcr阳性克隆进行斑点杂交,共筛选到103个差异表达cdna片段。对其中29个克隆进行了测序,与genbank中的已知基因序列进行同源性比较,发现有6个片段为促性腺激素α亚基前体基因(genbank注册号:ay207430),与同属不同种的石斑鱼促性腺激素α亚基前体基因有97%的同源性;1个片段为生长激素前体(genbank注册号:ay207431),与同属不同种的石斑鱼生长激素前体基因有99%的同源性;其余22个cdna片段与genbank中的序列无明显同源性。