提高免疫毒素dt386-gmcsf在e.coli中表达量的研究

以人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（gm-csf）受体（gm-csfr）为靶向的白喉毒素（dt）与gm-csf免疫毒素dt386-gmcsf为急性髓系白血病提供了一种新的替代治疗途径，但该蛋白在e.coli中的表达量很低，难以进行工业化生产。为探索造成其低表达的关键影响因素，对dt386-gmcsf中的gm-csf进行了c端的截短表达，发现gm-csf中l114编码序列可明显影响融合蛋白的表达量。在此基础上，构建了一系列突变体，发现保留1-123位氨基酸且将l114l115v116突变为g114v115t116的突变体df123gvt的表达量高于dt386-gmcsf，且对来源于高表达gm-csf受体的hl60细胞的肿瘤单细胞具有相似的细胞毒作用。df123gvt突变体的获得为gm-csfr靶向的免疫毒素的开发应用打下了基础。