人肝再生增强因子在毕赤酵母中的表达、纯化和生物学活性的研究

肝再生增强因子（alr）是一类胞源性肝细胞生长因子。为在毕赤酵母中分泌表达人肝再生增强因子（rhalr），以色谱法分离纯化后进行体外活性研究，构建表达载体ppiczαa-alr，经电穿孔转入毕赤酵母中，用0.5％甲醇诱导表达；重组酵母培养上清经sds-page电泳和westernblot鉴定后表明,rhalr以分子量为30kd的二聚体为主；定量分析结果表明，重组酵母培养上清中rhalr约占总蛋白的66％，表达量约为40mg/l；经deae柱和g75柱纯化后,获得的rhalr纯度大于95％，得率为52％；体外生物学活性实验表明，rhalr能明显促进hepg2、smmc-7721和nih-3t3细胞的增殖。