trim22对脂多糖诱导的巨噬样细胞促炎细胞因子的负向调节作用

目的:构建人trim22的重组逆转录病毒载体,观察过表达trim22对脂多糖(lps)诱导的巨噬样细胞促炎细胞因子产生的影响。方法:经pcr法扩增,把trim22克隆入逆转录病毒载体mscv2.2ires-gfp(mscv),并对重组载体进行菌落pcr、双酶切及测序鉴定。用lipofectamine将mscv、gag-pol、vsv-g载体共转染至293t包装细胞。用病毒上清感染u937细胞,通过流式细胞仪分选gfp阳性细胞。用佛波酯诱导u937细胞分化为巨噬样细胞,lps刺激后观察过表达trim22对促炎细胞因子表达的影响。结果:经测序等鉴定,成功构建mscv-trim22逆转录病毒表达载体。病毒上清感染u937细胞后,经流式细胞仪分选获得稳定表达trim22的u937细胞。lps刺激巨噬样细胞后,trim22过表达组tnfα和il6的表达水平显著小于对照组(p<0.05)。结论:成功构建人trim22的逆转录病毒表达载体,trim22能抑制lps诱导的巨噬样细胞tnfα和il6的产生。