β-内酰胺酶抑制多肽的串联表达及抑制活性研究

细菌对β-内酰胺类抗生素及β-内酰胺酶抑制剂产生耐受性使新型β-内酰胺酶抑制剂成为抗生素领域的研究热点。我们曾通过酵母双杂交系统筛选到了一个β-内酰胺酶的结合多肽sipis04-01，体外实验表明其具有抑制氨苄西林的活性，为提高其表达量，本文尝试基因串联表达方式-随机定向串联法成功构建了密码子改造之后的小肽sipis04-01编码基因sipis04-01n的双拷贝质粒pyg563，使表达产物中融合蛋白占细菌蛋白总量的比例较单拷贝表达提高了48.4%。纯化所得小肽sipis04-01n对tem-1类型的β-内酰胺酶具有体外抑制活性，并测定了抑制常数ki。