外源质粒电击转入pseudomonasputida的条件研究

以自行筛选的恶臭假单胞菌（pseudomonasputida）(命名为rs198，genbank登录号为fj788425）为受体菌，将具有卡那霉素抗性标记的大肠杆菌假单胞菌穿梭质粒pdsk519通过电转化法导入到受体菌中，对细胞生长状态、电转化温度、质粒dna及感受态细胞浓度、电击电压及电转化介质给予转化效率的影响进行研究。结果表明，在细胞生长至od600为0.5左右时收集菌体，在低温条件下制备浓度为4.6×1012/ml的感受态细胞，以0.3mol/l的蔗糖为电转化介质，在13kv/cm的场强下电击能获得较高的转化效率，最高可达1.3×107个转化子/μgdna。为构建恶臭假单胞的遗传转化系统，利用基因工程手段为该菌的进一步研究奠定了理论基础。