水稻瘤矮病毒p8蛋白的结构分析及其表达

为揭示水稻瘤矮病毒(rgdv)外层衣壳蛋白p8的结构特点及其在大肠杆菌中的表达特性。利用生物学软件和在线分析工具，对rgdvp8蛋白结构特征进行了生物信息学分析；同时将通过rt-pcr扩增的p8基因克隆到pgex-4t-1上，构建pgp8转化大肠杆菌e.colibl21(de3)，在iptg诱导下表达。利用表达的融合蛋白免疫家兔，制备了抗血清，并以rgdv、水稻矮缩病毒(rdv)、水稻条纹病毒（rsv）、水稻锯齿叶矮缩病毒(rrsv)4种病毒作为供试材料进行特异性检测。分析显示p8蛋白在c端位置有一个典型的跨膜螺旋区，整个蛋白也具有phytoreop8家族共有的典型结构域phytoreop8domain。sdspage和蛋白印记分析表明，rgdvp8融合蛋白分子量约为73kda，以包涵体的形式获得了高效表达。获得的效价高、特异性强的抗血清，为水稻瘤矮病毒的快速检测及p8蛋白的功能研究奠定了基础。