截短型胰高血糖素样肽-1的融合构建与表达

为了延长截短型胰高血糖素样肽1（shortedglucagonlikepeptide1，sglp1）在血浆中的半衰期，将sglp1的c端与人血清白蛋白（humanalbumin，hsa）的n端通过6个氨基酸的柔性连接子融合在一起，构建了融合表达菌株pichiapastorisgs115/sglp1hsa。以4g/lg418筛选出来的阳性工程菌株，经5l发酵罐培养，甲醇诱导48h，表达量可达0.8g/l。培养液经超滤、葡聚糖g25除盐、蓝色凝胶亲和层析纯化后，经hplc分析产物纯度达95%，回收率达60%。正常小鼠糖耐量实验和对gkⅱ型糖尿病模型鼠的治疗证明sglp1/hsa具有明显的降糖效果，为获得大量sglp1/hsa融合蛋白进行临床实验研究奠定了基础。