水貂igf-ⅰ基因的克隆、序列分析及原核表达分析

获得水貂igf-ⅰ基因的cdna序列，实现igf-ⅰ基因在大肠杆菌中的融合表达。利用rt-pcr技术从水貂肝脏组织扩增出水貂胰岛素样生长因子ⅰ（igf-ⅰ）的编码区序列。此序列编码153个氨基酸的前体蛋白质。同源性分析表明igf-ⅰ的核苷酸和氨基酸序列与已报道的金丝猴、小熊猫、大熊猫、东北虎、马等哺乳动物的序列高度同源（＞90%）。对位比较发现水貂的信号肽序列具有氨基酸特异性，这些氨基酸是否影响水貂igf-ⅰ分子的构型、进而影响功能则需要进一步的研究。将构建的重组表达载体pgex-6p-1-igf-ⅰ转入大肠杆菌bl21进行原核表达，得到高效融合表达，融合蛋白分子量约为34kd。western-blotting杂交证实了表达蛋白的抗原活性。本研究成功克隆、表达了水貂igf-ⅰ基因，分析和预测了其结构和功能，为进一步的生物活性研究打下基础。