重组pac1-ec1(n)对表达不同pac1变体的细胞系细胞活性的影响

垂体腺苷酸环化酶激活多肽(pituitaryadenylatecyclase-activatingpolypeptide,pacap)特异受体pac1(normal型)n端胞外域具有调控pac1活性的作用。为研究pac1-ec1(n)对表达不同pac1变体的细胞系活性的影响,利用基因工程技术获得c端带有6个his纯化标签的重组pac1-ec1(n)。质谱检测、sds-page电泳和westernblot检测结果均显示成功表达和纯化目的蛋白pac1-ec1(n)。westernblot检测确定兔眼角膜基质细胞、人神经母细胞瘤细胞sh-sy5y、人前列腺癌细胞22rv1中分别表达一个或多个分子量不同的pac1变体。重组pac1-ec1(n)作用3株细胞,mtt方法检测细胞活性,结果显示:pac1-ec1(n)有效促进只表达一个小分子pac1变体的兔眼角膜基质细胞的增殖;但显著抑制只表达一个大分子pac1变体的人神经母细胞瘤细胞sh-sy5y的活性。对于表达3种大小不一的pac1变体的人前列腺癌细胞22rv1,pac1-ec1(n)对细胞的活性具有复杂的调控。显示pac1-ec1(n)对表达pac1变体数量不同,类型不同的细胞具有不同的生物活性的作用,提示了pac1变体可能具有较复杂的自我调控机制。