甘油脱水酶再激活因子提高重组大肠杆菌3-羟基丙酸合成能力

甘油脱水酶是甘油转化3-羟基丙酸生物合成途径中的关键性限速酶,然而底物甘油的存在会抑制该酶的活性,从而引起3-羟基丙酸合成量的下降。因此解除底物甘油对甘油脱水酶活性的抑制作用,是提高生物合成3-羟基丙酸产量的方法之一。克隆来源于克雷伯氏菌(klebsiellapneumoniae)的甘油脱水酶编码基因dhab、甘油脱水酶再激活因子编码基因gdra、gdrb,以及来源于酿酒酵母(saccharomycescerevisiaew303)的乙醛脱氢酶编码基因aldh,分别构建了基因工程菌escherichiacolijm109/petac-dhab-tac-aldh和e.colijm109/petac-dhab-gdrab-tac-aldh,考察甘油脱水酶再激活因子对3-羟基丙酸生物合成的影响。在好氧条件下发酵28小时,e.colijm109/petac-dhab-gdrab-tac-aldh与e.colijm109/petac-dhab-tac-aldh3-羟基丙酸合成量分别为4.0g/l和0.54g/l,前者与后者相比,3-羟基丙酸合成量提高了6.4倍。研究结果表明,甘油脱水酶再激活因子能有效激活甘油脱水酶的活性从而提高了目标产物3-羟基丙酸的生物合成量。