猪链球菌口服疫苗的制备及小鼠血清免疫效果的评价

为构建猪链球菌(streptococcussuis)新型疫苗,给猪链球菌病的防治提供新思路,首先在大肠杆菌中表达猪链球菌毒力因子ef和mrp,以his-tag柱纯化重组蛋白,并制备ef和mrp鼠源多克隆抗体。随后将ef和mrp基因置于组成型启动子p59和信号肽usp45下,克隆到乳酸菌表达载体pmg36e上,电击转化到干酪乳杆菌(lactobacilluscasei)atcc27092中进行表达。westernblot检测显示ef和mrp蛋白均能在乳酸菌中成功表达,且ef蛋白的表达量随着重组菌生长时间的增长而增大,而mrp蛋白的表达量在重组菌生长到od600为0.8时达到最高,随后慢慢下降。用含有表达ef和mrp蛋白的重组干酪乳杆菌喂饲c57bl/6j小鼠,发现重组菌可在小鼠体内存活2d左右,并可有效刺激小鼠产生ef和mrp特异性抗体,为研制乳酸菌口服疫苗防治猪链球菌病的可行性进行了有益的探索。