一种核糖体展示单链抗体文库的构建与鉴定

用柑桔溃疡病致病菌xanthomonasaxonopodispv.citri（xac）全菌免疫小鼠，提取小鼠脾细胞mrna，rt-pcr扩增小鼠抗体重链可变区（vh）和轻链可变区（vl），采用linker(gly4ser)3连接vh和vl，构建用于核糖体展示方法筛选阳性单链抗体（scfvs）的文库。通过将scfv文库dna转化大肠杆菌jm109，随机挑取克隆子测序以分析单链抗体文库的多样性。结果显示，用柑桔溃疡病菌免疫后的小鼠抗血清效价为2500倍左右，扩增的vh大小为350bp左右，vl的大小为650bp左右，linker连接后的单链抗体文库dna大小为1200bp左右。测序结果显示，单链抗体文库多样性好。以xac为靶，筛选到了抗xac的特异性抗体，说明该抗体库可用于柑桔溃疡病菌单链抗体的筛选。