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中国生物工程杂志 2009
治疗型vp22△-me6△/me7重组蛋白疫苗的表达与免疫学初步分析Keywords: hpv-16,重组蛋白疫苗,分子内佐剂,vp22△,me6△/me7 Abstract: 制备16型人乳头瘤病毒me6δ/me7蛋白与i型人单纯疱疹病毒vp22δ蛋白的治疗型分子内佐剂融合蛋白疫苗,并检测其免疫原性和抗肿瘤相关生物活性。通过克隆hsv-1vp22δ及hpv-16me6δ/me7基因,构建pet28a-vp22δ-me6δ/me7原核表达载体。重组质粒在rosetta(de3)宿主菌中进行诱导表达,表达蛋白经分离、复性后,通过镍离子亲和层析进行纯化,纯化蛋白经sds-page、westernblot鉴定,并免疫balb/c及c57bl/6小鼠,检测其免疫原性和抗肿瘤活性。结果显示,vp22δ-me6δ/me7蛋白以包涵体形式表达,分子量约为34kda,表达量约占菌体总蛋白的45%。该蛋白免疫小鼠后血清特异性igg、特异性淋巴细胞增殖效果及对tc-1致瘤小鼠的肿瘤治疗效果均高于无佐剂单一重组蛋白疫苗。以上结果说明,所获得的重组融合蛋白具有较好的免疫原性和抗肿瘤活性,为治疗型hpv分子内佐剂疫苗的进一步研究奠定了基础。
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