hβd-3在大肠杆菌中的融合表达与纯化

抗菌肽是生物体内合成的一种具有抗菌活性的多肽类物质，对多种病原体乃至耐药性菌株具有明显的杀伤作用，是固有免疫及适应性免疫的重要参与物质。hβd-3是人体内一类内源性多肽，与其它β-防御素相比，耐高盐，具有灭活多种耐药性菌株的能力。针对如何高效表达和快速纯化这个问题，研究选用pet-ei质粒载体在e.coliblr（de3）表达原始序列hβd-3及密码子优化序列hβd-3i。经密码子改造后的重组抗菌肽hβd-3i的表达量是原始序列hβd-3表达量的约12倍之多。对融合表达产物进行“itc法”纯化蛋白，纯化后的hβd-3i具有与天然hβd-3相似的生物学活性，对金黄色葡萄球菌的活性强于伤寒沙门菌。表明利用pet-ei原核表达系统表达hβd-3是可行的，且因该纯化方法经济简便，为实现hβd-3大规模生产奠定基础。