基于胞内camp浓度测定融合蛋白ggh活性的改良方法

目的：改良一种基于胞内camp浓度变化，用于融合蛋白ggh生物学活性测定的方法。方法：根据融合蛋白ggh是glp-1类似物，能促进胰岛β细胞增殖，产生胞内第二信使camp的原理，利用酶联免疫法测定胞内camp的含量。结果：exenatide或融合蛋白ggh刺激大鼠β胰岛素瘤细胞rinm5f后，选用100nmol/libmx作为camp保护剂，用dpbs为药物稀释剂，采用液氮-100℃反复冻融2次裂解细胞，最后用酶联免疫法可稳定的测定上清液中camp含量。结论：成功改良了融合蛋白ggh体外高通量生物学活性测定方法。运用此方法可快速鉴定融合蛋白ggh及其它glp-1类似物的生物活性。