干扰gins2表达对hl60细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨靶向抑制gins2基因表达后对人早幼粒细胞白血病细胞株hl60增殖和凋亡的影响及其机制。方法:rt-pcr分别检测gins2基因在三株白血病细胞hl60、u937、thp-1的表达。设计与合成针对gins2基因的干扰序列,稳定转染高表达该基因的hl60细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况;rt-pcr和westernblot分别检测各组细胞转染后mrna和蛋白质水平;mtt法检细胞的增殖和凋亡情况;流式细胞术分析细胞的凋亡率;westernblot检测凋亡相关蛋白的表达。结果:在三株白血病细胞株中,gins2的表达量由低到高依次是:thp-1,u937,hl60。干扰质粒转染hl60细胞后,与阴性对照组及未处理组相比,干扰组gins2的mrna和蛋白质水平均显著降低,且细胞的增殖能力明显受抑。同时,凋亡相关蛋白bax表达水平显著增高而bcl2显著降低。结论:干扰gins2基因表达后,其mrna和蛋白质水平均显著降低,可通过上调bax表达,下调bcl2表达来抑制hl60细胞增殖并促进其凋亡。