含口蹄疫病毒iresrna病毒样颗粒表达载体的构建

利用pcr技术扩增大肠杆菌ms2噬菌体的外壳蛋白和成熟酶蛋白基因，将其克隆到pet32a中构建中间载体pet32a-cp。将fmdv的内部核糖体结合位点（ires）保守序列连接到中间载体噬菌体基因的下游，构建原核表达载体pcpes。将重组质粒pcpes转化宿主菌bl21(de3)，1mmol/liptg诱导表达。蔗糖密度梯度离心纯化表达产物。透射电镜观察到直径大约26nm的圆形病毒样颗粒。检测病毒样颗粒的稳定性并进行rt-pcr鉴定。结果表明该病毒样颗粒含口蹄疫病毒iresrna序列，并且稳定性良好，本研究构建的病毒样颗粒可以作为rna病毒检测时的标准品和质控品使用。