rna干扰抑制结肠癌细胞血管内皮生长因子表达

目的应用rna干扰技术抑制结肠癌血管内皮生长因子（vegf）表达。方法将vegf基因作为rna干扰的靶区，通过e-rnai网上提供的服务，设计两个特异的rna干扰序列，将其装入含u6启动子的载体上，构建成抗vegf基因的小发夹样rna（shrna）表达载体，再转染人结肠癌细胞ht29，通过rt-pcr、northern杂交、免疫荧光和western杂交，观察vegf表达受抑的程度。结果成功构建了两种抗vegf基因的shrna表达载体，rt-pcr、northern杂交、免疫荧光和western杂交，均发现其能明显抑制ht29细胞vegf基因的表达，抑制率分别达42%、88%、73%和82%。结论针对vegf基因的shrna表达载体能够明显抑制结肠癌细胞vegf基因的表达。