腺病毒介导的人ing4基因诱导c6鼠胶质瘤细胞凋亡

目的：研究肿瘤抑制基因人ing4(inhibitorofgrowthfamily,member4)对c6鼠胶质瘤细胞的促凋亡作用。方法：将携有绿色荧光蛋白（gfp）腺病毒空载体ad及重组腺病毒ad-hing4-his（由本科室构建）分别感染c6细胞，rt-pcr法检测hing4的转录，western-blotting法检测目的蛋白的表达。并观测hing4基因表达对c6胶质瘤细胞的作用，用mtt法绘制生长曲线，计算抑瘤率。再取重组腺病毒ad-hing4-his及空腺病毒ad作用后的c6细胞分别行激光共聚焦显微镜观察凋亡小体、透射电镜观察亚细胞结构的变化，抽提基因组dna行琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪检测。结果：ad-hing4-his感染c6细胞后，rt-pcr及western-blotting结果提示有目的基因的转录和表达。hing4基因表达可以显着抑制c6细胞生长。激光共聚焦观察可见明显核断裂、透射电镜可见实验组细胞呈凋亡表现、基因组dna电泳呈现梯形条带，流式细胞仪检测有明显ap峰，凋亡率达18.1％。结论：hing4可以通过促进细胞凋亡作用而显着抑制c6细胞的增殖和生长。