b3hm细胞免疫小鼠脾细胞scfv噬菌体展示文库的构建及表达

目的:利用噬菌体展示技术构建b3hm细胞免疫小鼠的脾细胞表达scfv文库。方法:用人骨髓细胞系b3hm细胞免疫小鼠，取其脾细胞采用rt-pcr方法扩增vh和vk基因并克隆入噬菌体展示表达载体，构建scfv文库，测定文库的库容量，bstni酶切单克隆分析文库的多样性，对文库进行富集检测，鉴定单克隆噬菌体与b3hm细胞结合反应。结果:文库的库容为5×106cfu，单克隆的bstni酶切图谱显示多样性，单克隆噬菌体抗体与b3hm细胞呈阳性反应。结论:噬菌体展示文库的成功构建为寻找新的致白血病相关基因，阐明白血病发病机理奠定了基础。