链霉菌a01-chit33ct产纳他霉素和几丁质酶协同表达发酵条件优化

生物农药由于具有良好的生态效应和安全性,因此比化学农药更受到人们的青睐,生物农药的发展契合低碳、循环、清洁绿色经济发展理念。因此,寻求利于食品安全和环境保护,同时高效控制植物病害的新型生物农药成为时下及未来研究的热点。链霉菌以产生纳他霉素等抗生素起到生防作用。链霉菌株a01-chit33ct既可以产生纳他霉素又可以高表达几丁质酶活,生防效果大大增加。为确定链霉菌a01-chit33ct产纳他霉素和几丁质酶协同表达的发酵条件,初步探索了碳氮源和发酵条件对菌株产生纳他霉素和几丁质酶的影响。结果表明,葡萄糖促进纳他霉素的产生而抑制几丁质酶的表达,因此分两阶段添加葡萄糖和几丁质粉来达到二者协同表达。研究确定最佳发酵培养基为:葡萄糖40g/l,几丁质粉10g/l(发酵4d添加),黄豆粉30g/l,大豆蛋白胨10g/l,caco35g/l,mgso4·7h2o0.5g/l,k2hpo40.5g/l。最优发酵条件为:初始ph6.0,温度28℃,转速180r/min。在此条件下,链霉菌a01-chit33ct产纳他霉素达1.52g/l,同时几丁质酶活达990u/ml,二者比优化前的水平分别提高了1.95倍和2.27倍。