5型和35型腺病毒纤毛蛋白的原核表达及活性验证

目的：原核表达5型腺病毒纤毛蛋白（ad5fiber）和35型腺病毒纤毛蛋白（ad35fiber），并对蛋白活性进行初步分析。方法：将重组质粒pet28a-ad5fiber和pet28a-ad35fiber转化入e.colibl21（de3），iptg诱导表达后，经ni-nta凝胶珠亲和纯化，用sds-page鉴定纯化蛋白，并用蛋白竞争性实验验证纯化蛋白的活性。结果：转化溶原菌后能够表达目的蛋白，ad35fiber蛋白对ad5（5型腺病毒）感染无影响，只能阻断ad5f35（5型腺病毒纤毛被替换为35型腺病毒纤毛的嵌合腺病毒）对细胞的感染；ad5fiber蛋白对嵌合腺病毒ad5f35感染无影响，只能抑制ad5对细胞的感染。结论：成功表达具有生物活性的5型和35型腺病毒纤毛蛋白，为进一步研究嵌合腺病毒ad5f35感染细胞的机制奠定基础。