均相时间分辨荧光(htrf)法测定重组单抗含量

建立了一种htrf检测方法，可以快速、简便、稳定地测定重组单克隆抗体的含量。将检测试剂、标准品及待测样品加入96孔板，孵育后即可在酶标仪上读取荧光信号值，用软件对信号值进行四参数曲线拟合，绘制标准曲线，根据标准品四参数方程计算待测样品中抗体的含量；同时对方法进行了验证。结果表明：该方法专属性强，抗体含量测定范围为25～1000ng/ml，线性相关系数在0.99以上，回收率范围为92.8%～103.6%，平均为98.9%；该法精密度较好，精密度的变异系数范围为0.2%～11.6%，平均为4.3%。适用于生物制药工艺开发过程中细胞培养上清、纯化产物及制剂中抗体含量的测定。