以mers-cov主蛋白酶为靶点的药物筛选体系的建立及应用

目的：以新型冠状病毒（mers-cov）主蛋白酶nsp5为靶点，应用荧光共振能量转移法（fret）建立药物筛选体系，并进行抑制剂的筛选。方法：采用原核表达系统、利用基因重组以及蛋白表达纯化技术得到目的蛋白，fret法检测蛋白酶活性，优化反应条件以及确定酶、底物的浓度，建立药物筛选体系，对700种化合物进行了检测。结果：应用建立的药物筛选体系，筛选到抑制率较高的化合物共6种，并测得ic50值，其中mdcccl002330的ic50值最低，为（0.43±0.03）μmol/l。结论：建立的药物筛选体系较为理想，适用于nsp5抑制剂的筛选，促进先导化合物的研发。