脑胶质瘤idh2基因突变hrm检测方法的初步建立

异柠檬酸脱氢酶2（idh2）基因突变常常发生于whoⅱ-ⅲ级的星形细胞瘤，少突胶质细胞瘤，和大部分继发性胶质母细胞瘤中。在临床上，idh2突变已经显示对胶质瘤患者有诊断和预后意义。拟通过提取胶质瘤石蜡包埋组织dna，优化pcr反应条件，初步建立idh2基因突变高分辨率熔解曲线（highresolutionmelting，hrm）检测方法。并与直接测序法对比，观察反应体系的检测灵敏度和稳定性。响应面分析结果证明20μlhrm反应体系中，引物浓度0.6μmol/l，模板量45ng，mg2+浓度2.75mmol/l，退火温度52.5℃为最佳。hrm检测idh2基因突变的结果和直接测序法一致，但灵敏度更高。表明所建立hrm方法简单，特异性强，准确可靠，可为idh2突变检测的临床应用提供借鉴和依据。