渗压震扰法释放aeromonassp.2016菌株外周间质中几丁质酶的研究

气单胞菌aeromonassp．2016菌株能产生多种几丁质酶,其中的胞外酶c可能聚集于细胞外周胞质。为了避免破碎菌体而产生过多的杂蛋白,探索了用渗压震扰法(osmoticshock)来释放这部分酶。主要步骤是:先将菌体悬浮在20％蔗糖-0．03mol／ltris-hci(ph8．0)高渗透压的溶液中,再快速转移到纯水低渗透压溶液中,产生瞬间渗压震荡,释放细胞外周胞质中的酶。结果表明,通过渗压震扰法释放出的酶纯度最高,比活力达到142．79u／g,比培养液上清液的54．46u／g和菌体破碎样品的14．66u／g分别高1．6倍和8．7倍,可用于纯化目的蛋白。