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中国生物工程杂志 2005
针对upa的sirna对人乳腺癌细胞侵袭的抑制作用Keywords: 尿激酶型纤溶酶原激活剂,尿激酶,sirna,肿瘤侵袭,boydenchamberassay Abstract: 目的:通过rna干涉的方法抑制乳腺癌细胞中upa的表达,观察upa的表达抑制后对肿瘤细胞的体外侵袭能力的影响。方法:(1)构建可以表达针对upa的sirna的干涉载体,转染高侵袭性人乳腺癌细胞系mda-mb231,g418抗性筛选,挑选单克隆株;(2)分别通过rt-pcr和westernblot的方法检测upa的表达;(3)平板克隆形成试验检测转染前后肿瘤细胞的克隆形成能力;4bovdenchamberassay检测肿瘤细胞体外侵袭能力。结果:(1)可以稳定表达针对upa的sirna的单克隆株,upa的表达水平显著下降;(2)转染了针对upa的sirna的单克隆株的克隆形成能力降低;(3)转染了针对upa的sirna的单克隆株体外侵袭能力与原代细胞mda-mb231相比明显受到抑制。结论:upa在人乳腺癌侵袭行为中发挥重要的作用,针对upa的sirna可以显著降低upa的表达,从而抑制肿瘤细胞的侵袭,可望成为抗肿瘤侵袭治疗的一种有效手段。
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