口蹄疫重组鸡痘病毒诱导猪特异性细胞毒性t淋巴细胞(ctl)杀伤活性检测

目的:评价口蹄疫重组鸡痘病毒vutal3cp1诱导猪产生特异性细胞毒性t淋巴细胞(ctl)杀伤活性的能力。方法:用pcr方法亚克隆o型fmdvvp1基因c末端部分片段(第130～213aa)。将其插入真核表达载体pdisplay中,构建质粒pdisplay-mvp1。将pdisplay-mvp1转染pk15细胞,经3次g418加压筛选,并用rt-pcr和ifa鉴定,证明获得表达目的基因的pk15/pdisplay-mvp1细胞。最后,利用该细胞作为靶细胞,用ldh法检测口蹄疫重组鸡痘病毒vutal3cp1免疫猪的特异性ctl杀伤活性。结果:vutal3cp1免疫组在效靶比25∶1和50∶1时,ctl裂解活性分别达到42.84%±32.1%和61.94%±42.8%,显著高于灭活疫苗组与其它对照组(p<0.01)。结论:vutal3cp1可以诱导猪产生高水平的特异性细胞毒性t淋巴细胞(ctl)杀伤活性,为进一步的fmdv基因工程疫苗的研究奠定了基础。