rnasea及其链亲和素融合蛋白在pet系统中的表达

在大肠杆菌中用pet28a表达载体表达重组rnasea。变性条件下,利用his-resin亲和纯化,得到60mg／l电泳纯的rnasea。纯化的rnasea复性后,利用含大量rna分子的碱法抽提质粒为底物,测定重组rnasea活性,与商品化的rnasea活性相当。同时在rnasea活性测定体系中加入4mol／l尿素会使rna分子切割效率提高10倍左右。在此基础上,成功表达rnasea与链亲和素(streptavidjn)的融合蛋白,经纯化复性后,该融合蛋白同时具有核酸酶、biotin结合活性,在分子生物学中具有重要的应用价值。