硅对pcr过程的抑制作用研究

探讨不同氧化程度的硅材料对pcr扩增的抑制作用及其机理。将不同氧化程度的硅纳米颗粒加入pcr反应液中,使其与taq酶、模板等充分接触,通过离心将硅纳米颗粒沉降在管壁上,取出上清或保留硅纳米颗粒上机扩增,扩增产物采用凝胶电泳法检测。结果表明,随着硅材料表面面积与pcr反应液体积之比的增大,核酸扩增效率将明显下降,并且在所研究的范围内,氧化程度高的硅材料对pcr过程抑制作用更强;通过对抑制作用机理进行初步的实验研究,表明硅材料对pcr反应液中的taq酶的吸附是导致抑制现象产生的主要原因,而对模板的吸附影响较小;并且,反应管内是否保留硅材料对核酸扩增影响较小,硅材料没有明显的直接化学抑制作用。