人hepcidin融合表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

为了在大肠杆菌中表达生产hepcidin,根据大肠杆菌密码子偏好性,化学合成了人hepcidin的基因序列,并构建了hepcidin的融合表达载体pet-hpc。pet-hpc在大肠杆菌bl21(de3)中表达的hepcidin融合蛋白以包涵体形式存在,其n端带有6个组氨酸。通过优化诱导表达条件,该融合蛋白表达水平显著提高,占总蛋白的25.2%。表达的包涵体经1%tritonx100洗涤后溶于8moll尿素,在变性条件下采用金属螯合层析进行纯化,所得融合蛋白纯度大于95%。