重组抗血红素scfv包涵体蛋白的复性及纯化研究

抗血红素多二硫键scfv在大肠杆菌中绝大多数表达产物为包涵体,为了获得可溶性的具有生物活性的scfv,摸索了不同的复性条件,包括透析法、稀释和层析相结合的方法。研究发现,先对溶解的变性scfv溶液稀释,进行初步的蛋白质复性,再利用sephadexg-25凝胶层析进一步复性、降低变性剂浓度和纯化,至少可以得到95％纯度,产率为150mg／l的目标蛋白,通过一次凝胶过滤层析,达到了去除变性剂、复性及纯化scfv蛋白三种目的,为多二硫键scfv在大肠杆菌中的表达和纯化提供了一种经济可行的方法。