hpv16l2肽段偶联ap205vlp的原核表达及免疫原性分析

目的:将编码hpv16衣壳蛋白l2的65~71、112~120免疫优势表位连接到rna噬菌体衣壳蛋白ap205氮端,组装形成病毒样颗粒,通过在大肠杆菌中实现表达及纯化,对其免疫原性进行研究。方法:合成编码ap205衣壳蛋白基因和hpv16l2的65~71、112~120位氨基酸表位的基因序列,pcr连接并克隆至pet30a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pet30-ap205-hpv16δl2,转化大肠杆菌bl21(dh3)感受态细胞,iptg诱导表达。表达蛋白经凝胶层析纯化及sds-page、westernblot等理化性质检测,免疫接种icr小鼠,通过间接elisa法检测其免疫原性。结果:成功构建重组表达质粒,重组蛋白在大肠杆菌中以可溶性表达,透射电镜观察可见典型病毒样颗粒,该vlp在动物实验中表现出较好的免疫原性。结论:成功将hpv16l2表位偶联ap205以形成vlp,在大肠杆菌中实现可溶性表达。