一种蛋白质b细胞表位展示系统的构建及验证

目的:建立一种能够有效展示蛋白质b细胞表位的载体系统,以用于表位特异性抗体的制备和表位疫苗的设计。方法:选用抗体的可变区作为蛋白质b细胞表位展示的骨架蛋白,b细胞表位的展示部位为cdr3区。全基因合成骨架蛋白基因,通过重叠pcr将b细胞表位编码序列插入到骨架蛋白基因中,原核表达目的蛋白,利用sephacryls-100层析柱进行蛋白纯化,用纯化的蛋白按常规方法免疫小鼠,采用elisa法检测免疫血清的滴度及特异性,通过westernblot和间接免疫荧光技术进一步验证免疫血清对目的蛋白的识别。结果:成功构建了3种表位展示蛋白,均表现出了很好的抗原性,表位展示蛋白免疫血清具有较好的特异性,能够特异识别所展示的b细胞表位。结论:抗体可变区作为骨架蛋白能够很好地展示b细胞表位,免疫小鼠后获得的免疫血清表现出了较好的特异性。