药用级微生物谷氨酰胺转胺酶的纯化工艺研究

为了提高谷氨酰胺转胺酶的纯度和扩展在医药领域的应用，探索了一种适合工业化生产的、安全高效的微生物谷氨酰胺转胺酶纯化方法。轮枝链霉菌发酵后，经离心10000r/min4℃除去菌体，调节发酵液电导率至4.1ms/cm和ph6.0后，以直线流速60cm/h通过spsepharoseff阳离子交换层析柱对目的蛋白高选择性和高载量地捕获，再通过phenylsepharose6ff（highsub）疏水层析柱进行精细纯化。纯化后经sds-page鉴定纯度达到95%以上，hplc分析纯度>99%。鲎试剂测定内毒素含量为0.013eu/ml，达到中国药典中血制品要求的低于0.15eu/ml标准。