凋亡抑制因子survivin的克隆、高效表达与纯化

survivin蛋白抑制细胞的凋亡并参与调控细胞的分裂，在绝大多数肿瘤细胞中均有过量表达。本实验以人肝癌细胞系mhcc-97l总rna为模板，应用rt-pcr的方法得到survivincdna，并构建了重组原核表达载体pet-21b(+)-survivin，导入bl21（de3）菌株进行表达，表达产物以包涵体形式存在，表达量超过总蛋白的60%。westernblot结果表明表达产物与抗人survivin抗体发生特异性反应，经凝胶过滤层析后纯度达到95%以上,为进一步研究靶向survivin的诊断试剂与抑制剂奠定了基础。