人eya基因家族的克隆、表达及转录活性分析

采用pcr方法从人组织或细胞cdna文库中扩增eya基因家族的完整编码序列，将所扩增的基因克隆到带flag标签的真核表达载体上，转染人胚肾293t细胞，westernblot鉴定eya基因家族的表达。检测eya基因及其与six基因共转染对mef3-luc转录活性的影响。经限制性内切酶分析和dna序列测定鉴定构建的重组表达载体正确，通过westernblot实验证明eya基因家族真核表达载体构建成功。荧光素酶活性测定显示eya能协同six激活肌细胞生成素的表达。本研究进一步证实eya是six的转录共激活因子，能提高肌细胞增强因子的活性。