盐角草磷酸乙醇胺n-甲基转移酶基因（sepeamt）启动子的克隆及瞬时表达

磷酸胆碱是合成磷脂酰胆碱和甘氨酸甜菜碱的重要前体，磷酸乙醇胺n-甲基转移酶（peamt）是磷酸胆碱合成的关键酶。根据已知的sepeamtcdna5'端序列设计两个基因特异的反向引物(pp1，pp2)，通过锚定pcr获得了peamt起始密码子上游1249bp的序列。rlm-race反应确定其转录起始位点a位于起始密码子上游301bp处，由此获得了948bp的sepeamt启动子序列。plantcare和place在线启动子预测工具分析表明：该序列除了含有启动子的基本元件tata-box和caat-box外，还含有一些胁迫诱导元件（如abre、hse、ltr）和花粉特异的激活元件agaaa。构建了sepeamt启动子与报告基因gus融合的表达载体ppro，并通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草，染色结果表明sepeamt启动子可以有效地驱动gus基因的瞬时表达。