芽孢杆菌bacillussp.s-1壳聚糖酶基因的克隆与序列分析

从连云港海滩晒虾蟹壳的泥土里筛选出一株产壳聚糖酶能力较高的菌株s-1，根据其形态特征、生理生化以及16srdna鉴定，初步认定该菌为芽孢杆菌属（bacillus）。利用ncbi数据库中已经报道的bacillus壳聚糖酶序列设计兼并引物，以菌株bacillussp.s-1的基因组dna为模板进行聚合酶链式反应（pcr），克隆到壳聚糖酶基因的部分序列；利用clontech公司universalgenomewalker试剂盒构建该菌株的基因组步移文库，根据已测定的序列信息设计特异性引物，结合两步法pcr技术分别克隆两端未知序列，拼接获得壳聚糖酶基因的全长序列（该基因全长1362bp编码453个氨基酸，注册号：eu924147），并对该序列进行了生物信息学方面的分析。