24-脱氢胆固醇还原酶抗氧化应激作用的功能结构域的鉴定

24-脱氢胆固醇还原酶（dhcr24）具有抗氧化应激引起的细胞凋亡的作用，但其机制尚不清楚。先前的实验数据显示在细胞水平dhcr24可能具有清除过氧化氢的作用。在生物信息学方法预测的基础上，构建了以pivex2.4a为载体的人dhcr24基因及其两种功能域缺失的突变型重组表达载体pivex2.4a-dhcr24（野生型）、pivex2.4a-ord（预测氧化还原功能域保留型）和pivex2.4a-ctr（碳端保留型），通过体外快速翻译表达系统rts500进行体外大量表达，经提纯得到各种dhcr24纯化蛋白。fluorocatalasetm荧光过氧化氢酶体外检测实验首次证明野生型dhcr24具有较强的过氧化氢清除能力，且dhcr24-ord突变型具有与野生型同等强度的过氧化氢清除活性，而dhcr24-ctr突变型则失去了此能力，提示dhcr24的氧化还原功能域在其清除过氧化氢作用方面起着重要作用。为了进一步研究其抗氧化应激作用的生理学意义，利用双重免疫荧光染色法对dhcr24在细胞内的定位情况进行了调查。结果表明，dhcr24定位于内质网，提示其内质网的定位可能与其抗氧化应激作用有关。