流感病毒神经氨酸酶的表达及其在药物筛选中的应用

a型流感病毒h5n1神经氨酸酶奥司他韦敏感型及耐药突变型基因经优化后，克隆于pcdna4/to表达载体，并转染t-rex293建立稳定细胞株，经四环素诱导能特异表达神经氨酸酶，其活性被特异性抑制剂奥司他韦所抑制。利用该稳定细胞株制备的神经氨酸酶，对3000多种天然产物和中药提取物进行了筛选，结果显示黄芩甙和黄芩素对奥司他韦敏感型神经氨酸酶和耐药型神经氨酸酶具有相似的抑制作用。该神经氨酸酶制备方法安全、简便、稳定，有利于建立神经氨酸酶抑制剂的高通量筛选方法。a型流感病毒h5n1神经氨酸酶奥司他韦敏感型及耐药突变型基因经优化后，克隆于pcdna4/to表达载体，并转染t-rex293建立稳定细胞株，经四环素诱导能特异表达神经氨酸酶，其活性被特异性抑制剂奥司他韦所抑制。利用该稳定细胞株制备的神经氨酸酶，对3000多种天然产物和中药提取物进行了筛选，结果显示黄芩甙和黄芩素对奥司他韦敏感型神经氨酸酶和耐药型神经氨酸酶具有相似的抑制作用。该神经氨酸酶制备方法安全、简便、稳定，有利于建立神经氨酸酶抑制剂的高通量筛选方法。