hasnpv几丁质酶重组蛋白的表达、纯化和复性

棉铃虫单核衣壳核型多角体病毒（hasnpv）是我国第一个商品病毒杀虫剂，具有使用安全、害虫不产生抗药性等优点，是一种很有发展潜力的生物农药。幼虫虫体受病毒感染后，hasnpv几丁质酶在其液化过程中起了很大的作用，因此可以作为增效剂以显著提高细菌、病毒、真菌等微生物杀虫剂的毒力，并具有更高的安全性。将hasnpv几丁质酶基因构建到原核表达载体pet28a中，经测序检验后转化至大肠杆菌rosetta，然后以iptg作为诱导剂，目标蛋白以包涵体的形式得以成功表达。在变性条件下，包涵体经镍次氮基三乙酸(ni-nta)柱层析纯化，并以两种不同的方法进行复性，均可获得具有活性的hasnpv几丁质酶。