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中国生物工程杂志 2010
原核表达的萝卜phgpx对黑色素瘤b16细胞紫外辐射损伤的恢复作用Keywords: 萝卜phgpx,定点突变,紫外辐射,细胞恢复 Abstract: 将大肠杆菌中高效表达的萝卜phgpx(rsphgpx)和突变的rsphgpx(mrsphgpx)融合蛋白,经glutathionesepharose4b柱亲和纯化和prescission蛋白酶柱上酶切,获得了不含gst标签的rsphgpx和mrsphgpx重组蛋白,纯度在90%以上。酶活测定验证了活性中心cys突变的mrsphgpx的活性显著低于rsphgpx。考察rsphgpx和mrsphgpx对紫外辐射损伤后的黑色素瘤b16细胞的恢复作用,发现活性较高的rsphgpx能有效提高细胞存活率,降低细胞膜脂质过氧化水平,而活性极低的mrsphgpx则几乎没有效果,提示由于rsphgpx能快速清除多种脂类过氧化物,可能主要通过抑制紫外辐射造成的细胞膜脂质过氧化损伤起作用。
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