重组人胰高血糖素样肽－1的表达及生物学活性

将人工合成的人胰高血糖素样肽-1（humanglucagonlikepeptide-1,hglp-1）基因插入质粒载体pet-32a(+)中，构建成rhglp-1与硫氧还蛋白（thioredox）及六聚组氨酸（hexahistidine）的融合表达载体pet32-glp-1，转化大肠杆菌bl21（de3）获得表达菌株，经iptg诱导发酵的菌体超声破碎后，裂解液用ni离子亲和层析纯化得到融合蛋白，经肠激酶裂解，再次ni离子亲和层析，得到rhglp-1样品。经sdspage和等电聚焦检测，样品纯度大于90％,等电点介于ph5.2～ph5.85之间。质谱测定rhglp-1分子量为3355.0kda，肽图分析得到2097.7kda和1005.5kda两个胰蛋白酶酶解片断，均与理论分析结果一致。动物实验表明重组蛋白具有明显的降血糖活性和促胰岛素分泌作用。